一步法PCR反應(yīng)液產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

YIJI一步法PCR反應(yīng)液產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

主要用途

YIJI一步法PCR反應(yīng)液是一種旨在方便、快速地進(jìn)行各種復(fù)雜基因組模板，小片斷DNA，保真度要求高，擴(kuò)增有難度的DNA擴(kuò)增的一步反應(yīng)體系。廣泛運(yùn)用在SAGE和數(shù)字化染色體基因型*分析等前沿技術(shù)。產(chǎn)品即到即用，無(wú)核酶污染，性能穩(wěn)定，操作方便迅速，擴(kuò)增產(chǎn)量高，效果滿意，質(zhì)量保證。

技術(shù)背景

該反應(yīng)液經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的熱啟動(dòng)高保真PCR反應(yīng)體系。靈敏度、特異性、穩(wěn)定性優(yōu)勢(shì)明顯，無(wú)需調(diào)整鎂離子濃度，無(wú)需擔(dān)心擴(kuò)增質(zhì)量，無(wú)需擔(dān)心反應(yīng)失敗。擴(kuò)增產(chǎn)量高，質(zhì)量?jī)?yōu)異。特別是擴(kuò)增后續(xù)的有效操作，例如質(zhì)粒克隆、DNA連接、測(cè)序等，效果堪稱同類(lèi)產(chǎn)品*。

產(chǎn)品內(nèi)容

YIJI反應(yīng)液（Reagent A）                                     600微升
YIJI補(bǔ)充液（Reagent B）                                       1毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)                                                   1份

保存方式

保存在-20℃冰箱里，有效保證6月

用戶自備

引物：用于擴(kuò)增反應(yīng)的引導(dǎo)分子
PCR管：用于樣品操作的容器
PCR儀：用于PCR反應(yīng)

實(shí)驗(yàn)提示

1．一次反應(yīng)總量為50微升
2．移取30微升YIJI反應(yīng)液（Reagent A）到0.5毫升PCR管
3．加入用戶自備的引物A和B（分別總量為350納克）
4．加入待測(cè)的DNA模板（100納克）
5．加入YIJI補(bǔ)充液（Reagent B）到總量50微升
6．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5秒
7．使用1000微升槍頭加入2滴礦物油（注意：參見(jiàn)注意事項(xiàng)4）
8．放進(jìn)PCR儀
9．PCR反應(yīng)程序?yàn)椋?/p>

溫度（℃）    時(shí)間    循環(huán)
95    2分鐘    1
95
Tm用戶設(shè)定溫度（50－62）
72    30秒
1分鐘
30秒    
35
72    5分鐘    1
10．PCR產(chǎn)物置于－20℃冰箱里保存，直到進(jìn)行任何后續(xù)實(shí)驗(yàn)
11．進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分析

注意事項(xiàng)

1．本產(chǎn)品為20次操作
2．建議整個(gè)操作在4℃下進(jìn)行
3．建議使用潔凈的PCR管和帶有濾芯的槍頭，以免污染
4．根據(jù)用戶PCR儀的性能，決定是否加入礦物油（Mineral Oil）
5．配制完成后，即刻進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，以確保反應(yīng)物的活性
6．根據(jù)Tm=4（G+C）+2（A+T）公式確定Tm溫度；建議使用分析軟件。用戶可以測(cè)試*Tm溫度。擴(kuò)增片段3kb以上可以增加Tm時(shí)間到2分鐘
7．對(duì)于基因組DNA的擴(kuò)增，其循環(huán)延長(zhǎng)時(shí)間為30秒至3分鐘，即小于500bp－30秒；小于2kb－1分鐘；大于2kb，每增加1kb，增加1分鐘
8．避免反復(fù)凍融
9．本公司提供PCR系列產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)核酶污染
3．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定反應(yīng)產(chǎn)量高
訂購(gòu)信息

單組分訂購(gòu)信息

編號(hào)                    名稱                                            規(guī)格        
YJ20008.2            YIJI一步法PCR反應(yīng)液                        20次
YJ20008.2A            YIJI反應(yīng)液（Reagent A）                        600微升
YJ20008.2B            YIJI補(bǔ)充液（Reagent B）                        1毫升

其它成分訂購(gòu)信息

產(chǎn)品編號(hào)    名稱    規(guī)格
YJ12008.1    10倍PCR*緩沖液    100次
YJ12008.2    一步法PCR反應(yīng)液    100次
YJ12008.3    超白金TAG DNA聚合酶    200 U
YJ12008.4    三磷酸脫氧核糖核苷酸（dNTPs）混合液    2.5/10mM：毫升
YJ12008.5    一步法平端PCR反應(yīng)液    100次
YJ12113    一步法熒光定量PCR反應(yīng)液    100次
YJ20024.2    基因甲基化特異性PCR擴(kuò)增（MSP）試劑盒    60次