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超氧陰離子試劑盒提取方法

更新時間:2024-05-07      瀏覽次數(shù):211

測定意義:



生物體內(nèi)超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號傳導的作用,但積累過多時會對細胞膜及生物大分子產(chǎn)生破壞作用,導致機體細胞和組織代謝異常,從而引起多種疾病。

測定原理:

超氧陰離子與鹽酸羥胺反應生成NO2,NO2在對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,根據(jù)A530值可以計算樣品中O2含量。

自備實驗用品及儀器:

天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、lv仿和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體8mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體6mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體6mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑四:lv仿,自備。

超氧陰離子提取

1. 植物、動物組織:稱取約0.1g樣本,加入提取液1mL,充分研磨,12000rpm,4℃,離心20min,取20μL上清測定蛋白含量,其余上清作為待測樣本。

2. 血清或培養(yǎng)液:直接測定。


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